NIBSC 01/452 流感抗A标准品

1. 预期用途

流感抗血清试剂 01/452 在绵羊中制备，用于 A/Panama/2007/99 抗原的单径向扩散测定。

2. 注意

NIBSC 01/452 流感抗A标准品 不适用于人类食物链中的人类或动物。

该材料不是人或牛来源。与所有生物来源的材料一样，这种制剂应被视为对健康有潜在危害。应根据您自己实验室的安全程序使用和丢弃它。此类安全程序应包括戴防护手套和避免产生气溶胶。打开安瓿或小瓶时应小心谨慎，以免割伤。

3. 单元

没有为该材料分配单元。

4. 内容

生物材料原产国：英国。

在 SHEEP (SH410/411) 中针对 A/Panama/2007/99 病毒的纯化 HA 制备抗血清。通过用菠萝蛋白酶处理从纯化的病毒中提取 HA 抗原，并通过在蔗糖梯度上沉淀来纯化 (Brand, CN and Skehel, JJ, Nature, New Biology, 1972, 238, 145-147。一剂约 50 微克 HA 与将弗氏*佐剂 (FCA) 肌肉注射到两只绵羊的每只中，两周后给予 10 微克剂量，并以每周间隔再注射两次。

初次免疫后八周，收集每种血清，加入NaN3（0.05% w/v）并将血清暴露于 tp pH5 两小时，以符合 EC 口蹄疫决定。收集血清，用含有NaN3(0.05% w/v) 的 PBS 缓冲液 1:3 稀释。将血清装入 2ml 体积的小瓶中。 28瓶测试称重的平均重量为2.015g，变异系数为0.41%

试剂 01/452 已在 pH5 中暴露 2 小时，随后通过 rt PCR 检测发现口蹄疫病毒 (FMDV) 活性为阴性。用于生产 01/452 的两只羊健康状况良好，没有口蹄疫的症状因此，血清试剂 01/452 符合 EC 2001 年 3 月 8 日的决定 (2001/190/EC) 关于英国 FMDV 的保护措施。

5. 存储

+2-8oC

请注意：由于冻干材料固有的稳定性，NIBSC 可能会在环境温度下运输这些材料。

6. 开瓶指南

NIBSC 01/452 流感抗A标准品  样品瓶有一个“上翻式"圆形瓶盖。无论是在瓶盖上还是在小瓶的套环上，都标有撬开瓶盖的位置。这暴露了塞子的一个区域，通过该区域可以使用皮下注射针头和注射器进行制剂的重构和取出。如果首先使用移液器，则使用镊子等*取下金属项圈，戴上合适的手套注意避免割伤。取下塞子以便进入。应注意防止内容物丢失。

7. 材料的使用

不应尝试称量材料的任何部分。对于 1ml 中含有 20-50 微克 HA 活性的抗原的测定，应将大约 8μl 未稀释的试剂添加到 1ml 琼脂糖中。 通过将 4μl 试剂添加到 1ml 琼脂糖中来测定较低浓度的抗原（5-20 微克 HA/ml）。 可能需要根据当地实验室条件更改这些抗血清浓度。 在加压和染色之前用 PBS 清洗凝胶可以提高 SRD 区域的清晰度抗血清试剂 01/452 应按照 Wood, JM, Schild, GC, Newman, RW 和 Seagroatt, VA Jornal of Biological Standarisation, 1977, 5, 237-247 所述的方法使用。