NIBSC89/548介白素6采用的是双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中人白细胞介素-6(IL-6)的水平。向预先包被了人白细胞介素-6(IL-6)单克隆抗体的酶标孔中加入白细胞介素-6(IL-6),温育;洗涤后,加入HRP标记过的白细胞介素-6(IL-6)抗体。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅与样品中人白细胞介素-6(IL-6)的浓度呈正相关。
NIBSC89/548介白素6注意事项:
1.从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差
3.建议所有标准品、样本都做双份检测。如标本中待测物质含量过高,请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再按说明书操作进行测定,计算时请乘以总稀释倍数(×n×5)。
4.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
5.为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。
6.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
7.底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
NIBSC89/548介白素6手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。